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透析袋的選擇

發(fā)布日期:2025-06-12 10:34:07   瀏覽量 :32
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一、透析袋的選擇:
選擇合適的截留分子量:
截留分子量(MWCO),是指留在透析袋內(nèi)的生物大分子的最小分子量。透析袋常規(guī)截留分子量包括100、500、1000、2000、3500、8000、10000、15000、20000、25000、50000、100000、250000、500000、1000000等種類,單位為道爾頓(D)。為了達到合理有效的分離,需分離的兩種物質(zhì)分子量的比率至少為25,因此,選擇截留分子量的經(jīng)驗法則:選擇截留分子量值約為要保留的大分子分子量的一半,才能獲得至少90%的保留率。
二、選擇扁平寬度:
透析袋扁平寬度的選擇取決于樣品體積和透析容量。較小的透析管透析更快;較大的透析管因擴散距離較長透析較慢。為易于使用,建議使用總長(包括閉合夾和頂部空間)為大約10-15cm的透析袋。
三、透析袋的使用方法:
前處理方法:
1.將透析袋剪成適當長度(10-20cm)的小段;
2.在2%碳酸氫鈉和1mmol/L EDTA(pH=8)中將透析袋煮沸10 min;
3.將透析袋用蒸餾水進行漂洗3次;
4.將透析袋放置于1mmol/LEDTA(pH=8)中煮沸10 min;
5.透析袋冷卻后存放于4度,并確保透析袋始終浸沒在液體中;注意從此步起用透析袋時一定佩戴戴手套進行操作;
6.在分離實驗之前要用蒸餾水將透析袋里外加以清洗。
四、使用方法:
使用透析袋進行分離時,一端用透析袋夾夾緊,由另一端灌滿水,用手指稍加壓,檢查不漏,方可裝入待透析液,通常要預(yù)留留1/3-1/2的空間,以防透析過程中,透析的小分子量較大時,袋外的水和緩沖液過量進入袋內(nèi)將透析袋漲破。此外,為了加快透析速度,除多次更換透析液外,還可使用轉(zhuǎn)子攪拌。小體積溶液的透析過程,可在袋內(nèi)放一截兩頭燒圓的玻璃棒或兩端封口的玻璃管,使透析袋沉入液面以下。
五、使用后處理方法:
使用后的透析袋經(jīng)適當?shù)奶幚砗?,一般會重?fù)使用。
1.保存前可用生理鹽水浸泡除去蛋白,并用蒸餾水清洗干凈,洗凈后置于50%乙醇中保存即可;
2.用蒸餾水徹底洗干凈,可存于4度蒸餾水中,若長時間不用,可加少量NaN2,防止長菌。
3.洗凈晾干的透析袋彎折時易裂口,使用時必須仔細檢查,不漏才能重復(fù)使用。
*以上均來源于網(wǎng)絡(luò)

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